这个实验原先其实一直有测,但是总是出现一个问题,如果高效的取出水相用于光谱测试,这次在温医这边补数据的时候,看着师弟放在铁架台上的分液漏斗,就突然在想是否可以像分液漏斗那样,从底部移出液体,受此启发,在样品管的下方直接戳了一个洞出来,让水层自然流出,其效果出奇的好。
操作步骤如下:
- 三个5 mL的离心管,分别加入2 mL的水和正辛醇,再加入浓度为4 μL的光敏剂。
光敏剂浓度为5 mM,相当于体系浓度为5 μM
在密封好样品管的前提下,使用摇床摇晃24 h。
摇晃完后,使用离心机进行离心,使水油两层明显分层。
离心机转速为2000 rmp,5 min
再取三个离心管,使用尖锐的针状物在样品底部扎孔,让其能够自然留下,在离心管中收集纯净的水相。
收集的水相进行吸收测试,并测试标准曲线用于水相浓度的计算。
计算出水相浓度后,反推油相浓度,其油水的比值为Po/w,在对这个比值进行取log,即为我们所说的油水分配系数。